Biologie
Molekularbiologie
Grundkurs Northern-Blot - Kurs B22
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In diesem Kurs erarbeiten wir mit Ihnen, wie Sie mit einem Northern-Blot RNA-Moleküle mit einer bestimmten Sequenz in ihrer RNA-Probe mittels Hybridisierungssonden nachweisen und quanitifizieren können.
Der Kurs umfasst dabei folgende Themenschwerpunkte:
- Spezifische Probenaufarbeitung und deren Optimierung
- Denaturierende-Gelelektrophorese
- Blottingverfahren
- Design, Synthese und Optimierung der DNA- und RNA-Sonden (u.a. DIG- und Biotinlabelung)
- Blottingverfahren
- Design, Synthese und Optimierung der Hybridisierungssonden (u.a. DIG- und Biotinlabelung)
- Detektionsverfahren und Auswertung der Analyseergebnisse (u.a. Chemilumineszenz, chromogene Substrate)
- Maßnahmenkatalog zur Vermeidung häufig gemachter Fehler und Problembehebung
- Membranstripping
- u.v.m.
n einer vertieften theoretischen Einführung werden die biochemischen Hintergründe der Northern-Blot-Technik besprochen, auf deren Basis dann auch Strategien zur Optimierung der Versuchsparameter abgeleitet werden können. Besonderen Wert legen wir dabei auf die vergleichende Diskussion verschiedener Methoden und ihrer Anwendungsgebiete in der Praxis, Maßnahmen zur Qualitätskontrolle der Versuchsschritte sowie der Vermeidung typischer Fehler bzw. Behebung häufiger Probleme bei der Durchführung von Northern-Blot-Analysen. In den praktischen Versuchen erarbeiten Sie sich dann die Fertigkeiten, die Sie für die erfolgreiche Durchführung der Analysen benötigen.
Für diesen Kurs sind grundlegende Vorkenntnisse aus der Molekularbiologie und über den Aufbau von Nukleinsäuren empfehlenswert.
Dauer: 2 Tage (Kursbeginn: 9:30 Uhr - Kursende: ca. 17:00 Uhr)
Teilnahmegebühr: € 585,-- (zzgl. MwSt.) inkl. Arbeitsmaterialien, Kursunterlagen, Teilnahmebestätigung, Mittagsimbiss, Pausensnack und Getränken.
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